Abstract
Introduzione e Scopo: la tiamina previene il danno metabolico indotto dall’alto glucosio in cellule microvascolari e riduce la progressione di retinopatia e nefropatia in animali diabetici; inoltre, i pazienti diabetici hanno una maggior clearance renale di tale vitamina. Abbiamo recentemente dimostrato che in cellule retiniche coltivate in condizioni simil-diabetiche l’espressione del trasportatore 2 della tiamina (THTR2) diminuisce, suggerendo per esso un ruolo chiave per il trasporto della tiamina nella retina e il suo coinvolgimento nel danno indotto dall’alto glucosio. L’obiettivo di questo lavoro era valutare un’eventuale modulazione dei due trasportatori della tiamina (THTR1 e THTR2), del fattore di trascrizione Sp1 e dell’attività della transchetolasi (TK) in modelli renali coltivati in condizioni simil-diabetiche. Metodi: l’espressione di THTR1, THTR2 e Sp1 è stata valutata tramite qRT-PCR e Western blot in glomeruli isolati da 5 topi C57BL6 diabetici streptozotocina-indotti vs 5 non-diabetici e in cellule glomerulari umane, (podociti – HPC, cellule mesangiali – HMC – e epiteliali del tubulo prossimale – HPTEC) coltivate per 8 giorni in glucosio fisiologico (NG), alto glucosio (HG) o glucosio intermittente (intHG). Inoltre, le cellule sono state coltivate in terreno privo di tiamina (TD) o in alte concentrazioni di quest’ultima (HT). L’attività di TK è stata misurata mediante un metodo cinetico enzimatico. Risultati: l’espressione di THTR2, ma non di THTR1, diminuisce nel glomerulo di topi diabetici. THTR1 non cambia in tutti i tipi cellulari. L’espressione di THTR2 viene modulata dalla deprivazione di tiamina: l’espressione dell’RNA diminuisce in HMC e aumenta in HPC; quella proteica diminuisce in HMC e in HPTEC. Inoltre, l’espressione di THTR2 è diminuita in HMC in intHG. L’attività di TK è marcatamente ridotta in TD. Conclusioni: questi dati sulle cellule renali confermano la modulazione di THTR2 in condizioni simil-diabetiche che avevamo già dimostrato nel microambiente retinico, suggerendo un ruolo chiave per questo trasportatore nel danno metabolico e nell’alterata disponibilità di tiamina nelle complicanze microvascolari del diabete.
Tipo: PD
Codice: 192