Ruolo del miR-214 nell’insulino-resistenza indotta dal Metilgliossale in cellule endoteliali MAEC

Numerosi studi hanno recentemente focalizzato l’attenzione sul ruolo dei microRNA (miRNAs) nella regolazione post-trascrizionale di importanti mediatori di vie molecolari coinvolte nella fisiologia della disfunzione endoteliale. Il Metilgliossale (MG) è un prodotto di scarto della glicolisi, che si accumula nei soggetti con diabete mellito (DM) e si associa allo sviluppo di complicanze vascolari. Abbiamo recentemente dimostrato che il MG compromette la sensibilità all’insulina nell’endotelio ed altera l’espressione di alcuni miRNAs. In questo studio abbiamo investigato il ruolo del miR-214 nell’insulino-resistenza indotta dal MG in cellule endoteliali di aorta murina (MAEC). In cellule MAEC trattate con MG si osserva una riduzione del 35% del miR-214 associata ad un aumento dei livelli della fosfatasi PHLPP2. L’inibizione del miR-214 con uno specifico inibitore aumenta i livelli proteici di PHLPP2. Invece, la sovraespressione del miR-214, ottenuta con uno specifico mimic, riduce l’espressione di PHLPP2 nelle MAEC non trattate, mentre nelle MAEC trattate con il MG ripristina i normali livelli della fosfatasi. La regolazione di PHLPP2 da parte del miR-214 è stata confermata dalla trasfezione di un inibitore specifico del sito di legame del miR-214 al 3’UTR dell’mRNA di PHLPP2 (miR-214 target protector), in grado di ripristinare i livelli proteici di PHLPP2 in MAEC sovraesprimenti il miR-214. Infine, similmente al MG, l’inibizione del miR-214 comporta una riduzione della fosforilazione insulino-dipendente di AKT, mentre la sua sovraespressione ripristina l’effetto indotto dall’insulina sull’attivazione di AKT in cellule MAEC trattate con il MG. In conclusione, questo studio identifica PHLPP2 come target del miR-214 in cellule MAEC e prova il coinvolgimento della ridotta espressione del miR-214 nell’insulino-resistenza endoteliale indotta dal MG.