Ruolo dei nanotubuli nella nefropatia diabetica

Obiettivo: la nefropatia diabetica (ND) è caratterizzata da un aumento della permeabilità glomerulare alle proteine. L’iperglicemia, inducendo stress ossidativo e disfunzione degli organelli intracellulari, è uno dei maggiori determinanti del danno podocitario. I nanotubuli (TNTs) mediano lo scambio di organelli tra cellule e sembrano avere un effetto protettivo. La proteina M-Sec gioca un ruolo cruciale nella formazione dei TNTs. Lo scopo di questo studio era quello di valutare la possibile rilevanza dei TNTs ed M-Sec nella ND. Metodi La formazione di TNTs è stata valutata su podociti wild type e knockout per M-Sec esposti a deprivazione sierica o ad insulti tipici della ND mediante epifluorescenza con ricostruzione Z-stack. Esperimenti di cocultura sono stati condotti per documentare il trasferimento di organelli TNT-mediato e le analisi sono state eseguite con epifluorescenza e time lapse. L’espressione di M-Sec è stata studiata: 1) su podociti in coltura esposti ad alto glucosio, TNF-alpha o acido retinoico (WB e/o RT-PCR); 2) in topi C57BL6 resi diabetici con streptozotocina e in animali di controllo non diabetici dopo 14 settimane di diabete (IHC,WB,RT-PCR); 3) su biopsie renali ottenute da pazienti con diabete di tipo 2 e ND conclamata e da soggetti non diabetici di controllo (IHC). La localizzazione glomerulare di M-Sec è stata valutata con doppia IF. Risultati La deprivazione serica induceva la formazione di TNTs e tale effetto era ridotto di oltre l’80% in assenza di M-Sec. L’alto glucosio, l’MCP-1 e gli AGEs aumentavano significativamente la percentuale di podociti connessi da TNTs. I TNTs mediavano il trasferimento di mitocondri ed endosomi e l’alto glucosio esaltava tale fenomeno. M-Sec era espresso dai podociti in coltura e la sua espressione era significativamente aumentata dopo esposizione ad alto glucosio, TNF-alpha ed acido retinoico. Nella ND sperimentale e umana l’espressione di M-Sec era significativamente aumentata a livello glomerulare con una distribuzione prevalentemente podocitaria. Conclusioni: questi risultati suggeriscono che la formazione dei TNTs M-Sec-dipendente potrebbe avere un ruolo chiave nella ND.